培養(yǎng)皿通常使用固體培養(yǎng)基制成平板培養(yǎng)(就是平板皿名稱的由來)，平板培養(yǎng)基制作是將已裝好的滅菌瓊脂培養(yǎng)基，用溫水(無菌)溶化，取下試管棉花塞，管口于酒精燈火焰上通過，然后微啟滅菌的培養(yǎng)皿蓋，使試管口能深入為宜，傾入培養(yǎng)基后即可蓋密，再輕輕地搖勻傾入的培養(yǎng)基，使之均勻地分布于皿底上凝結(jié)，即得平板培養(yǎng)基。
由于細菌的繁殖、發(fā)育生長是與所供給的培養(yǎng)基(營養(yǎng))有直接關系，尤其是作定量檢驗分析，對提供營養(yǎng)物的多少，有決定意義。
細菌培養(yǎng)時對營養(yǎng)提供的多秒、是否均勻，培養(yǎng)皿皿底是否平整極為重要，如培養(yǎng)皿皿底不平，瓊脂的培養(yǎng)基分布將隨培養(yǎng)皿皿底是否平整有厚有薄，薄的部分營養(yǎng)供給就不足，這對定量分析有著密切關系，故對定量培養(yǎng)皿皿底要求特別平整拜原因所在。但作一般定性(檢驗細菌、菌落生長、繁殖等)，使用普通培養(yǎng)皿即可。
細菌的分離培養(yǎng)，一般標本中常同時混有數(shù)種細菌，如口腔咽喉菌及耳朵的分泌物、痰液、小便、大便等，凡需研究的細菌，須先用分離培養(yǎng)法，使其成純種培養(yǎng)，通過對細菌作純種培養(yǎng)，用肉汁加2%瓊脂的固體培養(yǎng)基，經(jīng)保溫漏斗以脫脂棉花過濾，注入試管中，二天后檢驗無新菌，再投入培養(yǎng)皿內(nèi)，先制成平板，在無菌條件下進行接種，接種后把培養(yǎng)皿倒置移入25～35℃的恒溫箱內(nèi)(倒置是避免水蒸氣凝成液滴滴入皿底內(nèi)，影響菌落的生長)，通過培養(yǎng)進一步觀察細菌的形態(tài)和色澤，研究致病的病菌，以及對化防治的效果。
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